進(jìn)行 Input 樣本制備時(shí),擔(dān)憂蛋白降解、蛋白濃度不足等問(wèn)題?其核心關(guān)鍵在于樣本裂解效率與蛋白保護(hù)措施的精準(zhǔn)把控!輝駿生物 Input 樣本制備全流程視頻實(shí)操,全程標(biāo)準(zhǔn)化演示,有效規(guī)避實(shí)驗(yàn)誤區(qū),保障樣本制備質(zhì)量。
實(shí)驗(yàn)提示:
1?? 裂解液配制(加入適量蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,抑制蛋白降解,保護(hù)蛋白活性); 2?? 樣本裂解(根據(jù)樣本類型選擇超聲裂解或4°轉(zhuǎn)盤裂解,超聲時(shí)注意冰浴降溫,避免過(guò)熱損傷蛋白,裂解至樣本澄清無(wú)沉淀); 3?? 離心去上清(4°高速離心,收集上清液,去除細(xì)胞碎片、沉淀等雜質(zhì),上清液即為input樣本,避免沉淀干擾后續(xù)結(jié)合實(shí)驗(yàn))。
若Input檢測(cè)不到目標(biāo)蛋白/待測(cè)蛋白,或檢測(cè)到的條帶微弱,可能是以下原因+解決方案? ① IP抗體親和力不足(常見原因):抗體無(wú)法有效結(jié)合抗原,導(dǎo)致檢測(cè)不到目標(biāo)信號(hào),這種情況直接更換IP抗體即可; ② 目標(biāo)蛋白表達(dá)量低:可通過(guò)增加蛋白上樣量,提升蛋白檢測(cè)濃度或者是通過(guò)轉(zhuǎn)染帶標(biāo)簽的過(guò)表達(dá)質(zhì)粒,提高目標(biāo)蛋白的表達(dá)量。
若您在免疫沉淀(IP)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遭遇抗體輕重鏈污染問(wèn)題,輝駿生物科可為您提供專業(yè)解決方案:
① 標(biāo)簽Co-IP實(shí)驗(yàn):推薦選用輝駿生物標(biāo)簽納米抗體磁珠,涵蓋 Flag、HA、V5、GFP、RFP 等多種可選標(biāo)簽,可特異性結(jié)合目標(biāo)標(biāo)簽,有效規(guī)避抗體輕重鏈污染
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 說(shuō)明 |
FI8201 | 徹底消除抗體輕重鏈污染 | |
FI8202 | ||
FI8203 | ||
FI8205 | ||
FI8206 |
② 內(nèi)源Co-IP實(shí)驗(yàn):建議選用 IP專用二抗,通過(guò)特異性篩選設(shè)計(jì),顯著降低輕重鏈干擾,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。
廣州輝駿生物科技股份有限公司(Fitgene)成立于2011年,超15年科研服務(wù)經(jīng)驗(yàn),專業(yè)提供蛋白(抗體)和互作實(shí)驗(yàn)服務(wù),包括蛋白質(zhì)譜檢測(cè)、蛋白/RNA/DNA/化合物等分子間相互作用檢測(cè)、抗體穩(wěn)定表達(dá)株構(gòu)建、基因敲除和過(guò)表達(dá)細(xì)胞株構(gòu)建等;同時(shí)還研發(fā)了納米抗體磁珠、IP專用二抗、互作試劑盒、標(biāo)簽抗體等科研產(chǎn)品。
公司自有分子、細(xì)胞和蛋白等實(shí)驗(yàn)平臺(tái),服務(wù)經(jīng)驗(yàn)豐富,保證結(jié)果真實(shí)、可靠!我們不僅會(huì)提供專業(yè)的售前方案建議、而且售后技術(shù)支持將一直保持到文章發(fā)表,確保您安心進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)及投稿。
目前,客戶已在Signal Transduction and Targeted Therapy(IF: 52.7)、Journal of Hematology & Oncology(IF: 40.4)、European Heart Journal (IF: 35.7)、Molecular Cancer(IF: 33.9)、Cell Discovery (IF: 33.5)、Nature Methods(IF: 32.1)等高水平期刊成功發(fā)表大量高分文章。

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